Byla postavena roku 1535 pro Ferdinanda I., prvního habsburského panovníka v českém království. Zahrada je dokonalým místem pro jarní nebo podzimní romantickou procházku. Její známá azalková a tulipánová zahrádka je součástí botanické historie, protože právě zde se tulipány poprvé aklimatizovaly pro evropské podmínky než byly rozšířeny až do Holandska. Další součástí pražské královské zahrady je Lví dvůr, kde měl Rudolf II. svůj exotický zvěřinec.